重組腸激酶在25℃下的穩定性

一、試劑:

試劑A: 25 mM Tris HCl Buffer, pH 8.0 at 25°C (稱取Tris 0.303gr, 溶解在80ml 純化水中， 25°C，用2mol/LHCl 調pH 8.0，加純化水至100ml.)  

試劑B. 重組腸激酶酶液 

REK161101 (10U/µl, 1kU/支)，于25°C，室溫保存.

試劑C. 底物溶液

底物蛋白溶液: 50μg/支, 1mg/ml, 儲存在 -80°C.

二、操作步驟：

a.REK酶液25℃下放置，分別于放置的第1、2、3、5、7天測活。

b.按《重組腸激酶檢驗標準操作規程》測定酶活。如下：用試劑A稀釋REK 溶液至0.1 unit /μl，取1 µl 至底物溶液中50µl (50μg/支, 1mg/ml).混勻，25 °C酶切14-16h, SDS-PAGE分析酶切結果。 

三、實驗結果：

Fig. 1 REK 溶液 25℃保存穩定性

Lane 1, 底物; Lane2-6酶切結果：Lane2, 1d; Lane 3, 2d; Lane 4, 3d; Lane5, 5d; Lane 6, 7d.  

四、結論:  

REK溶液 25℃ 放置7天內穩定。