重組腸激酶在25℃下的穩定性
一、試劑:
試劑A: 25 mM Tris HCl Buffer, pH 8.0 at 25°C (稱取Tris 0.303gr, 溶解在80ml 純化水中, 25°C,用2mol/LHCl 調pH 8.0,加純化水至100ml.)
試劑B. 重組腸激酶酶液
REK161101 (10U/µl, 1kU/支),于25°C,室溫保存.
試劑C. 底物溶液
底物蛋白溶液: 50μg/支, 1mg/ml, 儲存在 -80°C.
二、操作步驟:
a.REK酶液25℃下放置,分別于放置的第1、2、3、5、7天測活。
b.按《重組腸激酶檢驗標準操作規程》測定酶活。如下:用試劑A稀釋REK 溶液至0.1 unit /μl,取1 µl 至底物溶液中50µl (50μg/支, 1mg/ml).混勻,25 °C酶切14-16h, SDS-PAGE分析酶切結果。
三、實驗結果:
Fig. 1 REK 溶液 25℃保存穩定性
Lane 1, 底物; Lane2-6酶切結果:Lane2, 1d; Lane 3, 2d; Lane 4, 3d; Lane5, 5d; Lane 6, 7d.
四、結論:
REK溶液 25℃ 放置7天內穩定。

2019年11月5日 11:17
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